Page 18 - עלון הנוטע יולי 2019 סלט פירות קייצי
P. 18
הטושפ תכרעמ התלגתה רושעכ ינפל :TALENs תכרעמ n - שב ׳גהנתי׳ סדנוהמה חמצה דציכ תעדל ןיא יכ םינעוט םידגנתמה
ןוגכ םיחמצ םיפקותה םיקדייחב הרוקמש תיטנג הכירעל רתוי .םינעדמה לש החוקפה םניע תחת וניא רבכ רשאכ חותפה חט
תודיחי ףצרמ תבכרומו TALENs הנוכמ וז תכרעמ .לפלפו זרוא היהת אל ךכו עבטב םיחמצל םינוש םינג ריבעהל לולע חמצ ותוא
דחא סיסב תרשוקו ההזמ תחא לכש ,׳Tal effectors' תונוכמה - שע ילטוקב שומישה תרבגה ןכתית ףסונב .חמוצה לע הטילש ונל
ןובלח רושק ולא תודיחי לא .)השולש לש ףצר אלו( א"נד לש הטילש אלל םהיניב וריבעי םיחמצש ןוויכמ הרבדה ירמוחבו םיב
.)4 רויא( א"נד ךתוח וניא אוה ךא ןוזמ יד םייק יכ םירבוסה שי .תונוש תויודימעל םינג
הבוגתה ןונגנמ הלגתה םייפלאה תונש תליחתב ,המוד ןפואב םינעוט םידגנתמה ןיבמ םינרמשה .תנגוה הרוצב םלועב קלוחמ
- נמ ףצר' ללוכ הז ןונגנמ .םיסוריו דגנכ םיקדייח לש תינוסיחה - יציה ראפ תאו יעבטה ךלהמה תא תונשל ןויסינב לוספה ןמ שיש
םיפצר םאותה( crisprRNA הנוכמה םיסיסב 20-כ לש 'הח .)2( תיקולאה הר
ליבומו Cas9 הנוכמה א"נד ךתוח ןובלחל רשקנה )םיסוריו לש שי תיטנג םיסדנוהמ םיחמצמ דחפהו םיסותימה תא רובשל תנמ לע
תכרעמ .סוריווה תסירהלו סוריווב א"נדה ךותיח רתאל ותוא תימונגה הסדנהה ךילהתב רושקה עדיה תא רוביצה ברקב קימעהל
םיחותיפ הרשפיאו רתויב תירלופופ הכפה CRISPR/Cas9-ה ילעב וא םיחמצב שומישש אצמנ אל םויה דע .ויתוכלשהו ויבלש לע
.)4 רויא( םינוש רקחמ ימוחתב םיבר .הקיזמ העפות יהשוזיאל םרג תימונג הסדנה תוקינכטב ונושש םייח
םייטנג םייוניש ילעב םיחמצ חתפל ץמאמהמ קלחכ :תימונג הכירע n
תושדח תויגולונכט - שה תועצמאב אלש ,תויודימע םינקמה םינג וא םירז םינג תובקע אלל
תויעבט תוכרעמ אתל :הרטמה ןג לש א"נדה ךותיח ירחא n הכירעל תושדח תויגולונכט וחתופ ,תוילקיזיפ וא תוימיכ תויצטומ תאר
םינפואב םייקתמ ןוקיתה .א"נד תריבש יקזנ ןוקיתל תויארחאש - מה יונישה תא וב עצבלו םונגב םוקמ לכ רוחבל תורשפאמה תימונג
- קתמ םירקמהמ קלחב רשאכ ,תונוש תואצותל ליבומו םינוש ןפואב .הרטמה ןג לש יוניש וא הקיחמ ,תפסות תויהל הלוכי וז .שקוב
הכירעל תכרעמה תלעפה רחאל .יוצרה יונישל ליבויש ןוקית לב לע ססבתמ תיטנגה הכירעה לש 'םילכה זגרא'ש רמול ןתינ יללכ
תא רוחבל ןתינו חמצה וא אתה לש א"נדה ףצר קדבנ תימונג ונייהד ,)םיסוריו וא םיקדייחמ( תויעבט תויגולויב תוכרעמ לש תונורתפ
.םייוצרה הכירעה יעוריא םע בולישב א"נדל )ףצרל םאתהב( יפיצפס ןפואב םירשקנה םינובלח
- במה םיינגסנרט םיחמצ רצייל איה םויכ תוצופנה תוטישה תחא (Endonucleases) תוזאלקונודנא םג םינוכמה ,'א"נד יכתוח' םינובלח
-אכ םיפצר רפסמ וא החנמה ףצרה תאו Cas9ןובלחה תא םיאט .ןגה תוליעפ תאו א"נדה ףצר תא םינשמ ךכ בקעו
תיטנגה הכירעה הלבקתה םהב םיאתה רשאכו םא .)5 רויא( הל דציכ םירקוח וליג תומדקומה םיעשתה תונשב :ZFN תכרעמ n
םיערז .םתיא ךישמהל ןתינ היהי ,אבה רודב םיערזל וכפהי היוצרה רבחל ןויערה תא ולביק ,א"נדל םירשקנ 'ץבא תועבצא' ינובלח
םיטרפל היצקלס עצבל היהי ןתינו וערזיי סדנוהמה חמצה לש הלא א"נד ףצר יוהיז לש היצקילפא לבקלו 'א"נד יכתוח' םינובלח םהילא
םינובלח םיאטבמ םניא םה ךא ,יוצרה הכירעה עוריא תא םיליכמש רשאכ ,ZFN הנוכמ וז םינובלח תחפשמ .רוזאה ותואב ולש ךותיחו
ראש תא אל םגו החנמה ףצרה תא אל ,Cas9 ןוגכ םהשלכ םירז .א"נד יסיסב השולש לש הנוש ףצר ההזמ 'ץבא עבצא' תדיחי לכ
חמצ רצייל תורוד רפסמ ךותב ןתינ וז ךרדב .היצקלסה לש םינגה .)4 רויא( שרדנה ףצרה תא רציילו תועבצא רפסמ רשרשל ןתינ ךכ
.תורז תוכרעמ לש תויראש ליכמ וניאש תיטנג ךורע
Cas9 לש וזכ ׳הטסק׳ סינכהל תורשפאמ תושדח תויגולונכט
:4 רויא
א"נדל סנכיהלו המצע תא לפכשל תלגוסמ וז .החנמ ףצרו
תוכרעמ
.)3( ינגסנרטה םיאצאצה רועיש תא לידגהל ךכבו חראמה
הכירעה
-בש איה וז הטישב תיזכרמ היעב :תיטנגה הכירעב רופיש n
תוצופנה תיטנגה
םירתאב א"נד יכותיח רתוי הברה תעצבמ תכרעמה לעופ
ZFN ,TALEN
לעו היד תיפיצפס אל תכרעמה ,רמולכ .הרטמה ירתא םניאש
CRISPR-ו
.הכירעה תויפיצפס תא ורפשיש םיחותיפ לע דבוע רקחמה ןכ
Genom edit- - תימונג הכירע( תיטנג הכירע עצבל ןתינ םויה ךתוח ןובלחה -
Cas9 ןובלחב םישמתשמ ןהב ,(RNP) תושידח תוטישב )ing גצומ א"נדה
רשקיהל םהל םירשפאמ ,הדבעמב םיזתנוסמה החנמ ףצרבו ףצרה ,לוחכב
- פה לולכל יושעש ךילהת( אתה ןיערגל םתוא םיליבומו הזל הז דמצנה החנמה
דעוימו א"נדל
אתב RNA-ו ןובלח לש תבורעתב םיפוצמ בהז יקיקלח לש הצצ
גצומ ךותיחל
- לחה הכירעה רחאל .)את ןפוד אלל םיאתב שומיש וא ,םוקאו לוגסו בוהצב
רכז ןיא חתפתמה חמצבו החנמה ףצרה םג ומכ קרפתמ ןוב
2019 ,ג”ע הנש ’עטונה ןולע‘ 18 ‘Alon Hanotea’ vol. 73, 2019